0 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Достоинства и недостатки бактериального посева

Бакпосев

Бактериологический посев (бакпосев) – это микробиологическое лабораторное исследование биологического материала человека путем его посева на определенные питательные среды при определенном температурном режиме с целью выявления наличия в нем любого количества патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и дальнейшего решения задач специфического лечения.

При выделении определенных микроорганизмов проводится второй немаловажный анализ – антибиотикограмма – определение чувствительности обнаруженных патогенов к антибактериальным препаратам и бактериофагам.

Преимуществами бактериологического посева являются:

• Высокая специфичность метода (то есть перекрестных ложных реакций не наблюдается).
• Возможность исследовать абсолютно любую биологическую жидкость человека.
• Лечебная цель – определение чувствительности выявленного микроба к тому или иному лечебному средству (антибиотикограмма), что позволяет с достаточно высокой точностью проводить лечебные назначения.

Недостатки бактериологического посева:

• Длительность получения результата.
• Высокие требования к забору материала.
• Определенные требования к квалификации персонала бактериологических лабораторий.
Показания для проведения бактериологического исследования

Применение микробиологического метода исследования достаточно широко распространено в медицинской практике, в частности, в инфекционных болезнях, гинекологии, урологии, хирургии, отоларингологии, онкологии и других. Безусловным показанием для необходимости проведения бакпосева являются любое воспалительное заболевание органов и систем организма человека, подозрение на септический процесс.

Материал для бакпосева

Для исследования забираются следующие биологические среды организма человека:

  • носоглоточная слизь,
  • слизь из зева,
  • секрет бронхиального дерева (мокрота),
  • испражнения (кал),
  • слизь уретры,
  • цервикального канала,
  • секрет простаты,
  • моча,
  • кровь,
  • спинномозговая жидкость,
  • грудное молоко,
  • желчь,
  • содержимое кист, воспалительных очагов, раневое отделяемое.

Баклаборатория

Баклаборатория
Какие микроорганизмы можно выявить при бакпосеве

В слизи носа и зева можно обнаружить:

  • гемолитические стрептококки (Streptococcuc pyogenes, Streptococcuc agalactiae),
  • пневмококки (Streptococcuc pneumoniae),
  • золотистый стафилококк (Staphylococcus auereus),
  • коринобактерии дифтерии (Corynebacterium diphtheriae),
  • гемофильную палочку (Haemophilus influenzae типа b),
  • менингококк (Neisseria meningitidis), листерии (Listeria).

В анализе кала (испражнениях) пытаются выявить:

  • кишечную группу бактерий – салмонеллы и шигеллы (Salmonella spp., Shigella spp.)
  • иерсинии (Iersiniae spp.),
  • тифо-паратифозную группу бактерий (Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A, Salmonella paratyphi B),
  • условно — патогенные возбудители кишечных инфекций,
  • анаэробные микробы,
  • возбудителей пищевых токсикоинфекций, а также обследовать кал на дисбактериоз кишечника.
  • В содержимом ран, биопунктате, гнойном отделяемом можно выявить псевдомонады или синегнойную палочку (Pseudomonas aeruginosa).

Слизь урогенитального тракта обследуют на предмет наличия в ней возбудителей инфекций:

передающихся половым путем – гонококка,

  • трихомонады,
  • грибов (Neisseria gonorrhoeae ,Trichomonas vaginalis, грибы рода Candida),
  • уреаплазму (Ureaplasma urealyticum),
  • микоплазму (Mycoplasma hominis),
  • листерии (Listeria), также можно исследовать мазок на бактериальную флору.

Кровь можно посеять (обследовать) на стерильность.

Такие материалы, как грудное молоко, моча, секрет простаты, соскоб, мазок, раневое содержимое, суставная жидкость, желчь исследуют на общую обсемененность (бактериальную флору).

Что такое бактериологический посев

Материал для исследования в бактериологической лаборатории помещают (делают посев) на специальные питательные среды. В зависимости от желаемого поиска того или иного возбудителя или группы возбудителей посев производится на разные среды.

Например, это может быть избирательная или элективная питательная среда (для роста какого-то одного возбудителя, рост других микробов при этом угнетается), примером которых может быть свернутая лошадиная сыворотка для выявления возбудителей дифтерии или среда с селенитом или с солями желчных кислот для обнаружения кишечных возбудителей.

Другим примером могут быть дифференциально-диагностические среды (среда Гисса), которые используются для расшифровки бактериальных культур. При необходимости с жидких питательных сред делают пересев на твердые среды с целью большей идентификации колоний.

Бакпосев. Колонии на твердой среде

Затем питательные среды помещают в термостат (специальный прибор), в котором создаются благоприятные условия (температура, влажность и др.) для роста и размножения возбудителей, в термостате среды находятся определенное время.

Далее проводят контрольный осмотр выросших колоний микроорганизмов, которые называют «культурой микроорганизмов». При необходимости проводят микроскопию материала колоний с предварительной окраской специальными красителями.

Что оценивается при контрольном осмотре

Это форма, цвет, плотность колоний, после дополнительного исследования – способность разлагать некоторые неорганические и органические соединения.

Далее проводят подсчет возбудителей. При микробиологической исследовании учитывается такое понятие, как колониеобразующая единица (КОЕ) — одна микробная клетка, способная образовать колонию, или видимая колония микробов.

По КОЕ возможно определить концентрацию или количество микроорганизмов в исследуемом образце. Подсчет КОЕ проводится разными методами: подсчетом колоний под микроскопом, методом серийных разведений, секторным методом.

Правила забора материала для бактериологического посева

Качество проводимого бактериологического посева во многом зависит от правильности забора материала для исследования.

Нужно помнить простое правило: стерильная посуда и стерильные инструменты!

Несоблюдение этих требований приведет к контаминации (внешней обсемененности материала представителями кожи и слизистых, окружающей среды, не имеющих клинического значения), что автоматически сделает исследование бессмысленным.

Для забора материала используют стерильную посуду, которая выдается в самой бактериологической лаборатории на руки пациенту при амбулаторном обследовании, для забора испражнений, мочи.

Из различных очагов воспаления забор проводится только стерильными инструментами (шпатели, петли, ложки) специально обученным медицинским работником (в поликлинике обычно это медсестра инфекционного или смотрового кабинетов).

Читать еще:  Гиперплазия эндометрия матки в менопаузе симптомы и диагностика

Кровь и мочу собирают в сухие пробирки, остальные материалы в посуду с транспортной питательной средой.

Стерильная посуда для забора мочи и испражнений

Другое правило: забор материала до начала антибиотикотерапии! На фоне приема антибиотиков результат будет существенно искажен. Если принимали такие препараты, то прекратить их прием за 10 дней до исследования и сообщить врачу о факте приема любых антибактериальных препаратов.

Должна быть обеспечена быстрая доставка в лабораторию! Микроорганизмы могут погибнуть при высыхании, изменении кислотности. Например, кал должен быть доставлен в теплом виде.

При заборе мочи: после утренних гигиенических процедур забирается средняя порция утренней мочи в количестве 10-15 мл в стерильную посуду. Доставить в лабораторию в течение 2х часов.

При заборе мазка из зева и носа: нельзя утром чистить зубы, полоскать рот и нос дезинфицирующими растворами, пить и есть.

Забор испражнений должен производиться утром стерильной лопаточкой в стерильную посуду в объеме 15-30 гр. Недопустимо попадание в пробу мочи. Доставка в течение 5 часов. Не допускается замораживание или ночное хранение. Собирать кал без применения клизм и слабительных.

Кровь для бакпосева берется до начала антибиотикотерапии на фоне подъема температуры в стерильную пробирку в количестве не менее 5 мл (детям), не менее 15 мл (взрослым).

Мокрота собирается утром натощак в стерильный контейнер во время приступа кашля со слизью. Перед забором почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой. Доставить в лабораторию в течение 1 часа.

Грудное молоко собирается после гигиенической процедуры. Околососковая область обрабатывается тампоном, смоченным 70% этиловым спиртом. Первые 15 мл сцеженного молока не используются. Затем 5 мл сцеживается в стерильный контейнер. Доставить в течение 2х часов.

Отделяемое половых органов: у женщин забор проводится не ранее, чем через 14 дней после менструации, не ранее чем через 1 месяц после отмены антибиотиков, желательно в течение 2х часов не мочиться; у мужчин – не рекомендуется мочиться в течение 5-6 часов до взятия пробы.

Сроки готовности бактериологического посева

При исследовании слизи из носоглотки результат будет готов через 5-7 дней, исследование испражнений займет около 4-7 дней. При обследовании соскоба урогенитального тракта длительность исследования займет 7 дней.

Посев на общую флору длится 4-7 дней. Больше всего по длительности готовится кровь на стерильность – 10 дней.

Однако самый ранний предварительный результат могут дать через 3 дня.

Расшифровка результатов бактериологического исследования

Результатом бакпосева является как качественная оценка (сам факт наличия возбудителя в исследуемом образце), так и количественная оценка (концентрация возбудителя в материале).

Расшифровка количественного результата проводится самым простым способом. Выделяют 4 степени роста (обсемененности) микроорганизмов в исследуемом материале:

  1. Для 1 степени роста характерен скудный рост только на жидкой среде, на твердой – роста нет;
  2. для 2 степени – рост на плотной среде до 10 колоний одного вида;
  3. для 3 степени – от 10 до 100 колоний;
  4. для 4 степени – более 100 колоний.

Это важно для условно-патогенной флоры, при выявлении которой 1 и 2 степень не считают причиной болезни, это просто свидетельствует о загрязненности материала для исследования, 3-4 степени указывают на этиологию (причину) заболевания. Если выделена патогенная флора, то учитываются все без исключения выделенные колонии, то есть все 4 степени.

Результат подсчета колоний в КОЕ/мл расшифровывается следующим образом:

  • 103/мл означает обнаружение 1 колонии;
  • 104/мл – от 1 до 5 колоний;
  • 105/мл – рост 5-15 колоний;
  • 106/мл – более 15.

Количественный результат важен не только для определения степени обсемененности, но и контроля правильности проводимого лечения.

Антибиотикограмма

Определение чувствительности выделенного микроорганизма к тому или иному антибактериальному препарату является важной составляющей бактериологического исследования.

Набор препаратов, к которому чувствителен или резистентен возбудитель, и является антибиотикограммой.

Чувствительность возбудителя – это восприимчивость к лекарственному препарату, то есть антибиотик подействует на рост и размножение микроба.

Резистентность – устойчивость возбудителя к тому или иному препарату, то есть антибактериальный препарат не подействует.

Антибиотикограмма выдается в определенных единицах измерения – минимальной ингибирующей концентрации (МИК).

Бактериологический посев

Бактериологический посев – диагностическое исследование направленное на установление наличия возбудителя болезни, его вида, а также определение его чувствительности к лекарственным препаратам.

Бакпосев позволяет выявить присутствие, как бактериальной, так и грибковой инфекции и назначить эффективную терапию. Наличие вирусов таким исследованием не диагностируется.

Принцип исследования: у пациента берут биологический материал и высевают в специальную питательную среду, после чего проводится микробиологическое исследование полученной культуры.

Результат может быть положительным – микроорганизмы обнаружены, и отрицательным – не обнаружены.

Виды биологического материала, подлежащего исследованию, разнообразны, и зависят от локализации симптомов заболевания.

Как проводится исследование

В лаборатории собранный материал помещают в термостат с питательной средой, где создаются необходимые для роста бактерий условия – температура и влажность определенного уровня.

Через 4-10 дней — это зависит от биологического материала и микроорганизмов, подлежащих выявлению, проводят контрольное и дополнительные исследования.

Читать еще:  Анализ мазка на флору расшифровка норма таблица

Диагностика проводятся в три этапа, каждый из них имеет собственную цель:

  1. Качественные исследования. Проверяется наличие микроорганизмов в посеве. В случае их выявления устанавливается форма возбудителя, его цвет, плотность фракций и «агрессивность» — способность разрушать определенные неорганические и органические соединения.
  2. Количественная диагностика. Устанавливает концентрацию возбудителя. Это важно для прогноза течения болезни и подбора комбинации и дозировки назначаемых препаратов.
  3. Антибиотикограмма. Определяется чувствительность высеянной микрофлоры к антибактериальным или антимикотическим препаратам. Это необходимо для назначения эффективной терапии.

Показания для бактериологического посева

Показаниями для проведения бакпосева являются воспалительные процессы любой локализации. Например:

  • острые и хронические заболевания органов дыхания;
  • гинекологические и урологические инфекции;
  • гнойные процессы;
  • кишечные расстройства;
  • воспаления суставов;
  • подозрение на сепсис.

В зависимости от системы организма, нуждающейся в диагностике, берут соответствующий биоматериал для бактериального посева:

  • Ангины, частые и длительно протекающие простуды, подозрение на дифтерию — мазок из зева и носа.
  • Пневмония, туберкулез — исследуют мокроту.
  • Цистит — на посев берут мочу.
  • Подозрение на кишечные инфекции или дисбактериоз — проводят исследование кала.
  • Половые инфекции — у женщин берут мазок с внутренних стенок влагалища, у мужчин — соскоб из уретры, при этом исследуют также и эякулят.
  • Диагностика менингита — спинномозговая жидкость.
  • Подозрение на сепсис — кровь из вены.

Достоинства и недостатки метода

К безусловным достоинствам метода бактериологического посева относится высокая диагностическая достоверность.

Это позволяет находить мишень заболевания и поражать ее «в десятку», выписывая узконаправленные препараты в максимально эффективных дозировках и сочетаниях. Таким образом, срок выздоровления пациента значительно сокращается и терапия, в конечном итоге, протекает более щадяще. Это происходит за счет того, что не назначаются препараты, которые провоцируют побочные эффекты, при этом, работая «вхолостую».

Недостатки метода – длительный срок исполнения, специфические требования к условиям забора материала, обустройству лаборатории и квалификации врачей-лаборантов.

Сроки выполнения анализа могут варьироваться от 4 до 10 дней, в зависимости от вида исследования.

Анализ кала готовится от 4 до 7 дней. Посев из носа и зева – 5-7 дней. Дольше всего занимает приготовление анализа крови на стерильность – 10 дней.

Предварительный результат можно ожидать уже через 3 дня. Тем не менее, при острых состояниях времени на ожидание нет. В этом случае назначают антибиотики широкого спектра действия или сразу несколько препаратов, что создает большую нагрузку на организм пациента и чревато проявлением побочных действий лекарств. Это очередной довод в пользу того, что не стоит запускать болезнь и заниматься самолечением.

Обращайтесь вовремя в клинику для проведения своевременной диагностики и назначения адекватной терапии.

Правила забора биологического материала и подготовки к анализу

При взятии биологического материала первоочередное значение имеет стерильность инструментов и емкостей. При несоблюдении этих правил происходит обсеменение материала бактериями из окружающей среды, что делает бакпосев неэффективным.

Кровь и мочу берут в сухие стерильные пробирки, остальные материалы в посуду с транспортной питательной средой.

Важна быстрая доставка материал для бакпосева в лабораторию и соблюдение правил транспортировки, так как микроорганизмы могу погибнуть.

Бактериологический посев не выполняется на фоне приема антибиотиков! Если вы принимаете антибактериальные препараты или прекратили прием за 10 дней до исследования или меньше, сообщите об этом врачу.

Как собирать материал для бакпосева:

  • Моча. Собирается после обязательных процедур утренней гигиены. Берется средняя порция около 10-15 мг в стерильную посуду. Доставить не более, чем через 2 часа.
  • Мазок из носоглотки. Перед манипуляцией нельзя пить, есть, чистить зубы, полоскать рот и промывать нос.
  • Кал. Собирается утром без применения клизм и слабительных при помощи стерильного шпателя в стерильную емкость. Нужно следить, чтобы в материал не попала моча. Доставить в лабораторию не более, чем через 5 часов.
  • Мокрота. Сбор производят утром натощак. Перед этим тщательно почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой. Мокрота должна быть доставлена в лабораторию в течении 1 часа.
  • Пробы из половых органов. Берутся не ранее, чем через месяц после отмены антибиотиков. Мазок у женщин можно брать через 14 дней после месячных. Женщинам нельзя мочиться 2 часа перед манипуляцией, мужчинам – 5-6 часов.
  • Грудное молоко. Перед забором молока необходимо продезинфицировать околососковую зону спиртовым раствором. Первые 15 мл не используют. Для анализа берут 5 мл в стерильную емкость. Материал должен быть доставлен в течение 2 часов.

Лучше всего выполнять взятие биоматериала в условиях медицинского учреждения или прямо в лаборатории – это гарантирует соблюдение всех правил и своевременную доставку, а значит максимальную достоверность диагностики.

Бактериологический посев — Бакпосев
Microbiological culture

Что такое бактериологический посев

Бактериологический посев (культуральное или микробиологическое исследование) — лабораторное исследование,при котором биоматериал,в котором предположительно могут находиться патогенные микроорганизмы,помещают в благоприятную для их размножения среду при определенных температурных параметрах с последующей оценкой результатов и определения чувствительности к антибактериальным препаратам.

Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) из-за высокой цены и длительного срока проведения не рекомендует применять культуральное исследование в повседневной практической практике при наличии других методов диагностики (окраска по Граму,ПЦР) и при выраженной клинической картине заболевания.

Читать еще:  Анализы которые могут понадобиться для диагностики боли внизу живота

Метод ценен для определения условно-патогенной микрофлоры,определения чувствительности к антибиотикам.Постепенно в практике заменяется полимеразной цепной реакцией (ПЦР)Преимуществом культурального метода явялется относительно высокая специфичность исследования и возможность лабораторного моделирования терапевтического воздействия на микроорганизмы и учет его эффективности — т.е. то,что обычно называют антибиотикограммой.
Недостатками являются длительность исследования,высокие требования к забору материала,повышенные требования к квалификации персонала лабораторий,что ведет к значительному удорожанию стоимости исследования и удлинению сроков лечения.
Лично я скептически отношусь к проведению различных бактериологических исследований,так как в большинстве случаев проблему излечения пациента удается решить в сроки,когда результаты бактериологического исследования еще не готовы.

Какие показания к проведению бактериологического посева

В современной венерологии редко приходится прибегать к бактериологическому методу исследования.По моему мнению в России отмечается некоторое злоупотребление этим методом,связанное с коммерческим интересами лабораторий и нежеланием или незнанием врачами методов синдромной диагностики и лечения половых инфекций.
Несомненными показаниями к проведению бактериологического исследования являются два заболевания : воспалительные заболевания малого таза у женщин и простатит у мужчин.С юридической точки зрения бактериологическое подтверждение диагноза гонококковой инфекции требуется при обнаружении в мазке грамотрицательных диплококков у девочек, пожилых женщин и беременных .В некоторых случаях исследование необходимо при хроническом,торпидном уретрите у мужчин и рецидивирующем вульвовагините у женщин.

Как проводится бактериологический посев

Материал для исследования:отделяемое из очагов поражения.Материал может браться не только из половых органов,но и из полости рта,прямой кишки.Правила забора аналогичны забору при ПЦР-диагностике.Сроки выполнения различны от нескольких дней до нескольких недель(зависят от определяемого возбудителя).Для забора материала используются стерильные специальные инструменты или тампоны.Материал помещают в транспортную среду,если забор проводится вне лаборатории и в дальнейшем его помещают в специальные питательные среды.В зависимости от задач исследования применяют множество сред с добавлением различных биопрепаратов и химических соединений.Питательная среда с внесенным материалам помещается в специальные приборы(термостаты),в которых создается и автоматически поддерживаются условия,необходимые для размножения микроорганизмов (температура,влажность,газовая смесь и.т.д.).По истечению определенного времени проводят контрольные проверки-осмотры питательных среды.Рост микроорганизмов происходит в виде так называемых колоний,обладающих видимыми характеристиками — размер,плотность,форма,цвет и.т.д.При необходимости проводится микроскопическое исследования материала,взятого из колоний с окраской специальными красителями.Для того,чтобы дифференцировать микроорганизмы,сходные по типу колоний и (или) микроскопической картине проводят дополнительное исследования по способностям микроорганизмов разлагать некоторые неорганические и органические соединения — так называемое исследование с помощью биохимического ряда.Для определения количественных показателей используют различные методы,о которых сказано ниже.Выделенный и определенный микроорганизм называют культурой.
Задача упрощается в тех,случаях,когда посев материала проводят на специальные среды,на которых могут размножаться только определенные виды микробов.(например среда Маккоя для определения хламидий).

Как проводится подсчет результатов

Интерпретация результатов микробиологического исследования материалов, полученных при обследовании половых органов представляет определенные трудности,и, в значительной мере, зависит от опыта врача-лаборанта и правильности техники проведения исследования.В результате проводимого исследования определяется микроорганизм или микроорганизмы,по наличию которых можно предполагать,что он (они) являются причиной патологических изменений в мочеполовых органах.В большинстве случаев помимо качественного определения (наименования микроорганизма) проводят и количественную оценку культуры.Наиболее простым методом оценки является определения степени роста:

На плотной питательной среде рост до 10 колоний микроорганизмов определенного вида.

На плотной питательной среде рост от 10 до 100 колоний.

На плотной питательной среде рост более 100 колоний.

В случае роста условно-патогенных микроорганизмов I и II степени роста чаще всего свидетельствуют о загрязнении, III и IV степени роста — об этиологической роли данного микроорганизма в воспалительном процессе.

Что такое колониеобразующие единицы (КОЕ)

Колониеобразующая единица ( colony-forming unit -CFU) — одна живая микробная клетка, из которой вырастает колония,по другим определениям — в идимая колония микроорганизмов, выросшая из одной клетки или из группы клеток.Определение КОЕ теоретически позволяет определить концентрацию(количество) микроорганизмов в единице объема.Если определения количества микроорганизмов например в 1 мл мочи или в 1 мл спермы не вызывает возражений и может приниматься во внимание при определении тактики лечения заболевания,то количественное определение микроорганизмов в отделяемом из половых органов (влагалища,уретры) вызывает большие сомнения — так в любом случае,независимо от методов подсчета,определяется количество микроорганизмов только во взятой пробе из половых органов,а не во влагалище,цервикальном канале или уретре в целом.

Поэтому определение различных «титров», «степеней»,
«количества» микроорганизмов в пробах,взятых из отделяемого влагалища и уретры не имеет никакого практического значения ни для диагностики мочеполовых инфекций,ни для назначения лечения,ни для контроля их излеченности.

Подсчет КОЕ проводят несколькими методами:

Метод серийный разведений

Из транспортной среды,содержащей биоматериал берется 1 мл,который последовательно разбавляется в 10 раз с посевом в пронумерованные пробирки с питательной средой.Та пробирка,в которой прекращается рост микроорганизмов считается максимальной границей количества микроорганизмов в пробе.Для примера количество концентрация микроорганизмов в нижеприведенной таблице составляет 10х 6

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector